在生物醫(yī)學(xué)研究中，細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)基礎(chǔ)而關(guān)鍵的技術(shù)。為了確保培養(yǎng)環(huán)境的純凈和穩(wěn)定，科學(xué)家們常常需要使用抗生素來預(yù)防和控制微生物污染。G418，作為一種常用的篩選抗生素，因其獨(dú)·特的作用機(jī)制和廣泛的應(yīng)用范圍，在細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域中扮演著重要角色。

G418簡介

G418，也稱為Geneticin或遺傳霉素，屬于氨基糖苷類抗生素。它通過與核糖體不可逆地結(jié)合，破壞其校對能力，導(dǎo)致翻譯過程提前終止或發(fā)生錯譯，從而抑制蛋白質(zhì)合成，阻止敏感細(xì)胞的生長。

作用機(jī)制

G418的結(jié)構(gòu)中含有雙堿基環(huán)醇和2-脫氧鏈霉胺，這些結(jié)構(gòu)通過糖苷鍵與氨基糖連接。G418的獨(dú)·特性來源于其C-6位置的羥基功能，而非氨基功能。這種結(jié)構(gòu)上的差異使得G418能夠與80S核糖體復(fù)合物特異性結(jié)合，相較于其他氨基糖苷類藥物，G418對真核細(xì)胞蛋白質(zhì)合成的抑制作用更為顯著。

篩選應(yīng)用

G418常被用于篩選表達(dá)氨基糖苷類修飾酶的細(xì)胞株。這些修飾酶，如氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶（APH），能夠共價修飾G418的氨基或羥基功能，削弱藥物與核糖體的相互作用，從而產(chǎn)生耐藥效果。當(dāng)真核細(xì)胞成功轉(zhuǎn)染新霉素抗性基因后，它們能夠高效表達(dá)氨基糖苷磷酸轉(zhuǎn)移酶，獲得在含有G418的選擇性培養(yǎng)基中生長的能力。

推薦使用濃度

G418作為真核翻譯抑制劑的推薦篩選濃度范圍為100-800 μg/mL。然而，有效的殺傷濃度會因細(xì)胞類型、培養(yǎng)基、生長條件等多種因素而異。因此，為了確保篩選的成功，建議通過實(shí)驗(yàn)確定每個特定培養(yǎng)系統(tǒng)的工作濃度。

康寧介紹

康寧公司是全·球領(lǐng)·先的生命科學(xué)和材料科學(xué)創(chuàng)新者，其細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品組合包括一系列抗生素和抗真菌試劑產(chǎn)品。這些產(chǎn)品可以滿足從殺菌到抑菌的多種需求，為細(xì)胞培養(yǎng)提供適合的環(huán)境，也可用于微生物或哺乳動物細(xì)胞的篩選性培養(yǎng)。康寧的產(chǎn)品以其高質(zhì)量和可靠性而聞名，是科研人員在實(shí)驗(yàn)室研究中不·可·或缺的工具。

儲存與訂購信息

G418有液體和粉末兩種形式，液體形式的濃度為50 mg/mL，粉末形式的純度大于700 μg/mg。儲存條件也有明確要求：液體需在2℃~8℃下保存，粉末則在15℃~30℃下避光存放。康寧提供多種規(guī)格的G418產(chǎn)品，以滿足不同規(guī)模研究的需求。